Papel de la plasticidad celular en la regeneración intestinalinducida por lesiones / Role of cell plasticity in injury-induced intestinal regeneration

El sistema intestinal posee una capacidad regenerativa intrínseca y fisiológica que tiene lugar a partir de las células madreLgr5+ ubicadas en el fondo de las criptas intestinales, las cuales se diferencian hacia las células progenitoras secretoras y absortivas con sus respectivas células especializadas mediante la activación de señalizaciones intracelulares como Wnt, Hippo y Notch. Condiciones adversas como lesiones e infecciones tisulares inducen esta actividad regenerativa promovida por variados mecanismos que influyen en el microambiente celular. El sistema inmunológico detecta alteraciones en el tejido intestinal y, a través de la activación de células inmunocompetentes y la secreción de citoquinas proinflamatorias, favorece la desdiferenciación de células especializadas hacia células madre para desencadenar la respuesta regenerativa. En cuanto al sistema nervioso entérico, su influencia está sujeta a modificaciones en la microbiota y los hábitos alimenticios, y se encuentra determinada en gran parte, por las células gliales entéricas y la expresión de distintos marcadores de plasticidad, que permiten limitar la lesión y reparar el tejido. Por su parte, la epigenéticamodifica la expresión genética y consecuentemente, la capacidadregenerativa intestinal, variando de acuerdo a cada paciente porla influencia de factores externos como la dieta o el estadopsicobiológico. De esta forma, la respuesta regenerativa intestinalinducida por lesiones, integra múltiples mecanismos y poseeimportantes repercusiones clínicas en cuanto a EII, disbiosise incluso tumorogénesis; conocer los mecanismos que regulanesta actividad puede sentar las bases para la creación de terapias innovadoras en el mismo ámbito(AU)

The intestinal system has an intrinsic and physiological regenerative capacity that takes place from the Lgr5+ stem cells located at the bottom of the intestinal crypts, which differentiate into secretory and absorptive progenitor cells with their specialized cells by activating intracellular signalslike Wnt, Hippo and Notch. Adverse conditions such asinjuries and tissue infections induce this regenerative activity promoted by various mechanisms that influence the cellular microenvironment. The immune system senses disturbances in the intestinal tissue and, through the activation of immunocompetent cells and the secretion of proinflammatorycytokines, favors the dedifferentiation of specialized cells intostem cells to trigger the regenerative response. Regarding theenteric nervous system, its influence is subject to modificationsin the microbiota and dietary habits, and is largely determinedby enteric glial cells and the expression of different plasticitymarkers, which enable to limit injuries and repair tissue. On the other hand, epigenetics modifies genetic expressionand, consequently, intestinal regenerative capacity, varying according to each patient due to the influence of external factors such as diet or psychobiological status. There fore, the intestinal regenerative response induced by lesions integrates multiple mechanisms and has important clinical repercussions in terms of IBD, dysbiosis, and even tumorigenesis; knowing themechanisms that regulate this activity can lay the foundations for the creation of innovative therapies in the same field (AU)

Ganglioneuromatosis intestinal difusa a lo largo del tubo digestivo / Diffuse intestinal ganglioneuromatosis along the gastrointestinal tract

Resumen Introducción: Los ganglioneuromas son neoplasias histológicamente benignas derivadas del sistema nervioso simpático, cuya ocurrencia en el tubo digestivo es rara y comúnmente sindromática. De acuerdo con el patrón de la lesión y la extensión se dividen en ganglioneuroma polipoide, poliposis ganglioneuromatosa y ganglioneuromatosis difusa. El objetivo de este trabajo es presentar el hallazgo incidental post mortem de ganglioneuromatosis difusa del tubo digestivo en una paciente sin afectación sindromática. Caso clínico: Se describe el caso de un paciente de sexo femenino de 2 años con atresia traqueoesofágica tipo III corregida quirúrgicamente que cursó con recanalización fistulosa, múltiples episodios de neumonía por aspiración y choque séptico. Durante el último ingreso cursó con hemorragia pulmonar masiva y falla multiorgánica. En el estudio post mortem se identificó hipertrofia del píloro y de los troncos y plexos nerviosos entéricos con células ganglionares maduras entremezcladas. Se identificó ganglioneuromatosis que afectaba todos los segmentos del tubo digestivo, con predominio de los plexos mientéricos. Conclusiones: La ganglioneuromatosis intestinal es una rara enfermedad que presenta un espectro de lesiones desde una forma aislada hasta sindromática con morbimortalidad elevada. Por ello, es necesario conocer la enfermedad, indagar sistemáticamente cuando se sospeche y apoyarse de estudios genéticos que confirmen o descarten alguna asociación sindromática.

Abstract Background: Ganglioneuromas are histologically benign neoplasms derived from the sympathetic nervous system, whose occurrence in the gastrointestinal tract is rare and often syndromic. According to the injury pattern and extension, lesions are divided into polypoid ganglioneuroma, ganglioneuromatous polyposis, and diffuse ganglioneuromatosis. This work aimed to present the incidental post mortem finding of diffuse ganglioneuromatosis of the gastrointestinal tract in a patient without syndromic involvement. Case report: We describe the case of a two-year-old female patient with surgically corrected type III tracheoesophageal atresia and fistulous recanalization, multiple episodes of aspiration pneumonia, and septic shock. During the last admission, she developed massive pulmonary hemorrhage and multi-organ failure. Post mortem histopathological study identified hypertrophy of the pylorus and enlarged enteric nerve trunks and plexuses with intermingled mature ganglion cells. We identified ganglioneuromatosis affecting all gastrointestinal tract segments with the predominance of the myenteric plexuses. Conclusions: Intestinal ganglioneuromatosis is a rare disease with a spectrum of lesions ranging from isolated to syndromic with high morbidity and mortality. Therefore, it is necessary to know the condition, investigate systematically when it is suspected, and rely on genetic studies to confirm or rule out any syndromic association.

Morphoquantitative study of Rattus norvegicus submucosal plexus by different neuronal evidentiation histochemical techniques / Estudio morfocuantitativo del plexo submucoso de Rattus norvegicus por medio de diferentes técnicas histoquímicas para verificar características neuronales

Enteric nervous plexuses have been the object of several studies, specially the myenteric plexus whose studies describe its organization, functions and alterations. On the other hand, the submucosal plexus has been less studied and still needs descriptive studies. To analyze morphologically and quantitatively submucosal neurons of the jejunum of 90-day-old healthy rats using different techniques for neuronal staining as a way to provide normality data to compare with future experimental studies. Whole mount preparations of the jejunum were submitted to Giemsa, NADH-diaphorase and NADPH-diaphorase techniques to stain the total neuronal population, more metabolically active subpopulation and subpopulation of nitrergic neurons, respectively. Neurons of the submucosal plexus of adult rats are mainly organized in ganglia with varied sized and shapes. Giemsa technique stained 243.93 ± 7.68 neurons per mm2. Regarding the total population stained by Giemsa, NADH- diaphorase positive (139.09 ± 11.14/mm2) neurons represented 57 % and NADPH-diaphorase positive (18.17 ± 0.28/mm2) represented 7.5 %. The area of the cell body was bigger in nitrergic neurons (412.29 ± 150.22) than in the ones stained by Giemsa (254.71 ± 63.32) and NADH-diaphorase positive (243.98 ± 123.82).

El plexo nervioso entérico ha sido objeto de varios estudios, especialmente el plexo mientérico, cuyos estudios consisten en describir su organización, funciones y alteraciones. Por otro lado, el plexo submucoso ha sido menos investigado y todavía necesita estudios descriptivos. Para analizar morfológica y cuantitativamente las neuronas de la submucosa del yeyuno de ratas de 90 días de edad, se realizaron diferentes técnicas de tinción neuronales, en animales sanos, como una forma de proporcionar datos de normalidad y compararlo con futuros estudios experimentales. Se realizaron montajes con preparados enteros del yeyuno que fueron sometidos a las técnicas de Giemsa, de NADPH-diaforasa y NADH-diaforasa para teñir la población total neuronal, subpoblación más activa metabólicamente y subpoblación de neuronas nitrérgicas, respectivamente. Las neuronas del plexo submucoso de ratas adultas se organizan principalmente en los ganglios con variaciones de tamaño y formas. Con la técnica de Giemsa se tiñeron 243.93±7.68 neuronas por mm2. Con respecto a la población total teñida con Giemsa, fueron positivas para NADH- diaforasa en 139.09 ±11.14 / mm2 neuronas, representando el 57% y fueron positivas para NADPH-diaforasa en 18,17 ± 0,28 / mm2 neuronas, lo que representó el 7,5%. El área del cuerpo celular fue mayor en neuronas nitrérgicas (412,29 ± 150.22) que en las teñidas con Giemsa (254,71 ± 63,32) y NADH-diaforasa positivas (243,98 ± 123,82).

Toxoplasma gondii induces death of gastric myenteric neurons in rats / Toxoplasma gondii induce la muerte de neuronas del plexo mientérico gástrico en ratas

The aim of the study was quantifying and morphologically analyzing the myenteric neurons of the small and large gastric curvatures of the glandular stomach of rats infected the tachyzoites of the Toxoplasma gondii for 30 days. Ten male rats were assigned into two groups: Control Group (CG) and Experimental Group (EG). The animals from the CG received saline solution orally whereas the EG animals received 104 tachyzoites of the T. gondii genotype III strain (BTU II). After 30 days, euthanasia was conducted for the removal of the stomach, which was dissected under the stereomicroscope for removal of the tunica mucosa and the tela submucosa. Whole mounts were stained with Giemsa. Quantification of the myenteric neurons was conducted by using a 40X-objective microscope in 40 microscopic fields for the region of the small gastric curvature and 40 fields for the large gastric curvature of the glandular stomach of the animals from both groups. The cell body of 50 myenteric neurons from each region was measured for each animal. Chronic experimental infection caused by the genotype III strain of Toxoplasma gondii was verified to reduce myenteric neuron density only in the small gastric curvature region of the glandular stomach, not resulting in significant changes in the size of the neurons.

Este estudio tuvo como objetivos cuantificar y analizar morfológicamente neuronas del plexo mientérico de las curvaturas gástricas menor y mayor del estómago glandular de ratones infectados durante 30 días por taquizoítos de Toxoplasma gondii. Fueron utilizados 10 ratas machos distribuidos aleatoriamente en dos grupos: grupo control (GC) y grupo experimental (GE). Los animales del GC recibieron solución salina por vía oral y los animales del GE recibieron, por la misma vía, 104 taquizoítos de Toxoplasma gondii de una cepa genotipo III (cepa BTU II). Tras 30 días, se realizó eutanasia para retirar el estómago, que fue disecado bajo el estereomicroscopio para retirar la túnica mucosa y tela submucosa. Preparados de membrana fueron coloreados por la técnica de Giemsa. La cuantificación de neuronas mientéricas se realizó con microscopía óptica, con objetivo de 40X en 40 campos microscópicos para la región de la curvatura gástrica menor y 40 campos para la curvatura gástrica mayor del estómago glandular, en ambos grupos. Se midió el área del cuerpo celular de 50 neuronas mientéricas de cada región en cada animal. Se verificó que la infección experimental crónica provocada por la cepa de genotipo III de Toxoplasma gondii en ratones, redujo la densidad de neuronas mientéricas solamente en la región de curvatura gástrica menor del estómago glandular, no llevando a alteraciones significativas el tamaño de las neuronas.

Atrophy of the nitrergic myenteric neurons in the descending colon rats submitted to protein and vitamin deficiency / Atrofia en neuronas mientéricas nitrérgicas en el colon descendente de ratas sometidas a deficiencia de proteínas y vitaminas

Effects of protein and B-complex vitamin deficiency were assessed with respect to the morphometry of myenteric neurons in the descending colon of adult rats. Sixteen animals were divided into two groups: Control Group (CG, n=8) and Experimental Group (EG, n=8). The CG received 22 percent protein chow and the EG received 4 percent protein chow for 120 days. The descending colon was submitted to NADH- and NADPH-diaphorase technique in order to evidence nervous cells in the whole mounts preparations. In the EG, NADH-d positive neurons presented reduced nuclei, while NADPH-d positive neurons showed atrophy of the soma area (~41.7 percent) inducing an increase of the proportion occupied by the nucleus inside in the soma of these cells.

Esta investigación buscó evaluar los efectos de la desnutrición proteica y vitamínica delcomplexo B sobre aspectos morfométricos del plexo mientérico del colon descendente de ratones adultos. Dieciséis animales fueron distribuidos en dos grupos: control que recibieron ración comercial con 22 por ciento de proteína y experimental alimentados con ración de tenor proteico reducido para 8 por ciento, durante 120 días. Neuronas del plexo mientérico presentes en preparados totales fueron evidenciados a través de la técnica histoquímica de la NADH-diaforasa y de la NADPH-diaforasa. En el grupo experimental, las neuronas NADH-d positivos sufrieron reducción del núcleo celular, ya las neuronas NADPH-d sufrieron atrofia de 41,7 por ciento de la superficie de su pericarion, lo que hizo con que el núcleo celular pasase a ocupar una mayor proporción de la región trófica de las neuronas.

Análise morfométrica e quantitativa dos neurônios do plexo mientérico do ceco de ratos submetidos a intensa carência de proteína / Análisis morfométrica y cuantitativa de las neuronas del plexo mientérico del ceco de ratas sometidos a una intensa carencia de proteína / Quantitative and morphometric analysis of myenteric neuron from the cecum of rats submitted to intensive protein deficiency

Avaliaram-se os efeitos crônicos de uma dieta severamente hipoprotéica, sobre aspectos quantitativos e morfométricos de neurônios mientéricos, NADPH-diaforase positivos do ceco de ratos jovens. Oito ratos foram divididos em dois grupos, sendo que para um dos grupos foi oferecida ração com teor protéico de 26% (controle) e, para o outro, ração com o teor protéico de 4%, mantendo-se o balanço vitamínico e mineral durante 12 semanas. Após eutanásia, o ceco de cada animal foi coletado e dissecado para confecção de preparados de membrana, os quais foram submetidos à técnica da NADPH-diaforase. Para contagem e mensuração destes neurônios, o ceco foi dividido em quatro regiões: apical mesentérica; apical antimesentérica; basal antimesentérica; próxima à ampola cecal. Não se observou alteração significativa para o peso dos animais, área do ceco e densidade populacional dos neurônios mientéricos no final do experimento. Por outro lado, em algumas regiões do ceco, os neurônios tiveram redução da área nuclear, com conseqüente redução da área do pericário

The chronicle effects of a severe hypoproteic diet on quantitative and morphometric aspects of NADPHdiaphorase-positive myenteric neurons from the cecum of young rats were assessed. Eight rats were divided into two groups. One group (control) was fed with 26%-protein chow and the other with 4%-protein chow during 12 weeks. The vitamin and mineral balance was kept. After euthanasia, the cecum of each animal was collected and dissected for the whole-mount preparation, which were submitted to NAPDH-diaphorase. The cecum was divided into four regions for counting and measurement of neurons: apical mesenteric, antimesenteric apical, basal antimesenteric, and next to the cecal ampulla. Significant alterations were not noted with respect to the weight of the animals, cecum area, and population density of myenteric neurons at the end of the experiment. On the other hand, in some regions of the cecum, the neurons presented a reduction of the nuclear area with resulting reduction of the soma area

Se evaluaron los efectos crónicos de una dieta severamente hipoprotéica, sobre aspectos cuantitativos y morfométricos de neuronas mientéricos, NADPH-diaforase positivos del ceco de ratas jóvenes. Ocho ratas fueron divididas en dos grupos, siendo que para uno de los grupos fue ofrecida ración con tenor proteico de 26% (control) y, para el otro, ración con el tenor proteico de 4%, manteniéndose el balance vitamínico y mineral durante 12 semanas. Tras eutanasia, El ceco de cada animal fue recolectado y disecado para confección de preparados de membrana, los cuales fueron sometidos a la técnica de la NADPH-diaforase. Para recuento y mensuración de estas neuronas, el ceco fue dividido en cuatro regiones: apical mesentérica, apical antimesentérica, basal antimesentérica y próxima a la ampolla cecal. No se observó alteración significativa en el peso de los animales, área del ceco y densidad poblacional de las neuronas mientéricas al final Del experimento. Por otro lado, en algunas regiones del ceco las neuronas tuvieron reducción del área nuclear, con consecuente reducción del área del pericario